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首发上市!国产热启动修饰LAMP恒温扩增产品登场!

2022-06-07 02:14:19

自荧光定量PCR技术出现后,因其高特异,高灵敏,可定量,直接读取结果等特点迅速应用到临床、食品、环境的检测中,尤其在病原体检测中发挥了重要作用。但传统的荧光定量PCR方法需要专业设备,时间较长,对实验环境与操作人员有较高要求,难以满足现代快速核酸检测的需求。

在新冠检测中,抗原检测以其简单易用,自主判读、低成本等优势在许多国家广泛应用。然而,与核酸检测相比,抗原检测的主要缺点是灵敏度较低,存在漏检低病毒载量感染者的可能。

等温扩增方法可以弥补qPCR和抗原检测方法的不足。样品可以在单一温度下快速完成扩增反应,大大降低了对设备的要求,缩短了检测时间,更符合快速核酸检测的要求。

宝锐生物通过高通量筛选平台获得了Bst2.0,该酶以其优异的灵敏度和抗抑制性能受到客户的好评,同时通过蛋白修饰技术平台的研发工作,率先推出了国产Bst酶的热启动版本Bst2.0 HS,使LAMP试剂的特异性和灵敏度获得进一步提升。在此基础上宝锐生物开发出一系列目视法、荧光染料法、探针法等各类LAMP、RT-LAMP恒温扩增试剂。上述原料均可提供相应的可冻干版产品。


针对LAMP普遍存在的非特异性问题,宝锐生物开发出了Bst 2.0 HS DNA 聚合酶,可完美替代进口产品。

Bst 2.0 HS是在Bst 2.0 DNA 聚合酶的基础上采用可逆性修饰技术获得的热启动等温聚合酶,能够在室温下完全封闭酶的活性,可在室温下建立反应,防止非特异性扩增,提高反应效率。另外,Bst 2.0 HS DNA 聚合酶不需要单独的激活步骤。


1.1 特异性检测

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宝锐Bst2.0 HS可完美替代进口产品,宝锐Bst2.0 HS可以达到与竞品同样的特异性,且优于常规Bst酶。


1.2 常温放置稳定性检测



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宝锐Bst2.0可以实现室温操作。


实验表明,加入模板配制全混反应体系后,在25度温育3小时(绿色)与配制后即时反应(蓝色)两种条件下,宝锐Bst2.0 HS与进口对照Bst2.0 ws.具有相同的反应特征,未经热启动修饰的Bst酶室温温浴3小时后反应性能下降,热启动修饰的Bst酶能够与即时配制的性能相当,有效保持反应性能的稳定。


2.1 DNA提纯模板性能对比


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2.2 RNA提纯模板性能对比

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3.1 全血中直扩性能(染料法,检RNA)


3.2 口腔拭子直扩性能(染料法,检RNA)

口腔拭子取样方法:

手握住取样拭子的手柄(注意手和其他物品不要碰到采样头部),伸进口腔一侧(接触脸颊内部),用刷牙的力度上下擦动15下,在另一侧重复此动作。将拭子放进含有1mL TE Buffer中,搅动10下,弃拭子,得拭子溶液

3.3 唾液中直扩性能(染料法,检RNA)

采样方法:

在采集唾液样本时,用舌头多刮几次上下颚,同时用牙齿稍微刮一下舌头,保证唾液中脱落细胞的数量。


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