项目背景介绍
生物制品生产中常用起始原材料、原材料或辅料潜在的病毒污染是影响产品安全性的关键因素。牛源性物料如新生牛血清、胰蛋白酶等在生物制品生产过程中普遍使用。对生产过程中牛源性病毒的检测是控制生物制品的病毒安全性风险、保证生产质量的重要手段。
法规要求
《中国药典》2020版第三部中规定，应对生物制品生产过程使用的相关物料（起始原材料、原材料和辅料）的病毒进行筛查，对生产工艺中病毒清除效果进行验证，并对产品（中间产物和成品）病毒污染进行检测。
若生产者在建库之前，细胞基质在建立或传代历史中使用了牛血清，则其建立的MCB或WCB和（或）生产终末细胞至少应按照通则3604的要求检测一次牛源性病毒。美国药典、欧洲药典等国外法规对牛源性病毒的检测也有类似的要求。
珠海宝锐生物科技有限公司依据中国药典的相关要求开发了牛源病毒核酸检测试剂盒（PCR-荧光探针法），可与珠海宝锐生物科技有限公司的核酸提取或纯化试剂盒I（磁珠法）配套使用，可以实现单管中同时检测多种靶标，经过全面的性能验证，灵敏度高，特异性强，稳定性好，使用便捷。
产品优势01灵敏度高
检测限达到1 copy/μL，对5种牛源性病毒核酸进行验证，分别做24次检测，检出比例均可达到23/24以上。结果如表1所示：
表1：5种牛源性病毒检测限数据汇总
02. 特异性强
验证了27种基因组DNA（LLC-MK-2、CHO、HEK293、BHK21、SP2/0、大肠杆菌、PK-15、NS0、Vero、Sf9、MDCK、MDBK、C6、杂交瘤细胞、CRFK、毕赤酵母、耻垢分枝杆菌、LLC-MK-3、中间葡萄糖菌、β-金黄色葡萄球菌、嗜酸乳杆菌、表皮葡萄球菌、哈茨木、丙酸杆菌、牛-无乳酸菌、红曲霉、铜绿假单胞菌等）与牛源病毒核酸检测试剂无交叉反应。
03 操作便捷快速
1. 试剂盒包含待检的5种病毒对应序列的阳性对照，便于对检测结果进行监控，无需额外采购。
2. RNA反应体系和DNA反应体系使用相同的扩增程序，减少操作步骤，提高仪器使用效率。
3. 从样本提取到检测结束，仅需不到2小时。
04. 适用性强
验证了多种基质样本和多种PCR扩增系统，试剂盒性能不受影响。
05. 体系可靠
1. 含内部质控（IC）和阳性质控（PC），有效避免假阴性和假阳性结果的出现。
2. 采用UDG酶防污染系统，避免污染风险。
06. 干扰评估
验证了8种基质样本（RPMI1640、SP2/0培养液、10%FBS、10%特级胎牛血清、100%特级胎牛血清、DNA稀释液、细菌培养基、PBS等）对牛源病毒核酸检测试剂均无干扰。
07. 耐用性
1. 冻融稳定性：试剂盒反复冻融3次、5次、7次、10次，检测限样本检测结果为阳性，中值样本精密度CV≤5%，说明试剂盒冻融10次内，稳定性良好。
2. 精密度：检测不同操作者和不同仪器间精密度，高、中、低值样本，各进行10个重复，其CV%均小于5%。
3. 仪器适用性：在ABI 7500、Bio-Rad CFX96、SLAN-96P、SLAN-96S、罗氏Light cycler 480 Ⅱ、博日FQD-96A等不同型号设备上性能均不受影响。
参考文献：
1.《中国药典》2020版第三部-生物制品生产和检定用动物细胞基质制备及质量控制。
2.《中国药典》2020版第三部-3604新生牛血清。
3.《欧洲药典》。
4.《日本药典（JP第17版）》。
