加帽率是mRNA疫苗药物的重要质量属性指标，是mRNA类产品申报所必须的验证资料。目前，加帽率的测定主要通过液质联用的方式进行。具有帽子结构的mRNA 与未加帽的 mRNA 其分子量之间存在百数量级的差异，相比于完整mRNA 数十万级的分子量，很难精确分析加帽与未加帽样品之间的差异。因此，对加帽率的分析首先需要将长片段的mRNA处理成小片段，将数十万中找百数量级的差异转变为数千中找百数量级的差异。
酶法加帽↓
共转录加帽↓
宝锐生物开发的mRNA加帽率检测前处理试剂盒能精确、高效的处理mRNA样品，处理后的样品可直接用于液质联用的分析，助力快速分析样品加帽率。本试剂盒适用于不同加帽方式和具有各类帽子结构的mRNA样品前处理。
1试剂盒组分试剂名称 体积
吸附磁珠 250μL
Mreagent 12μL
10×M buffer 50μL
Loading buffer 50μL
Buffer 1 1mL
Buffer 2 10mL
Buffer 3 1mL
EB buffer 1mL
2操作流程
3产品特点适应性好
★ 可用于不同加帽工艺生产mRNA的处理
★ 可用于具有不同类型帽子结构mRNA的处理
★ 可用于不同型号液质联用系统的样品处理
方便快捷、高效省时
4探针设计与合成
5酶切
酶切后进行SDS-PAGE检测。酶切后的体系中含有探针条带、目的片段条带和其他片段。其中，目的片段条带清晰，其含量基本和探针含量一致，明显高于其他片段，表明酶切的过程处理得当，样品可用于下一步回收操作。
6片段回收
洗杂回收后的片段经过SDS-PAGE检测，除了目的条带和探针条带外的其他片段已被清洗干净。样品中探针的存在并不会对后续液质联用的测定产生影响，相反的，已知分子量的探针条带可以作为后续测定的标尺。
7液质联用测定与分析
液相色谱图
样品峰总离子流质谱图
Cap0和unCap离子流质谱分析
液质联用测定与分析
液相色谱图
样品峰总离子流质谱图
Cap1和Cap0离子流质谱分析
附：产品目录
