货号 MD2071-4

2×Fast Direct Premix-UNG IV (Probe qPCR)

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2×Fast Direct Premix-UNG IV (Probe qPCR)

产品概述

Fast Direct Premix-UNG Ⅳ (Probe qPCR) 是专用于免除样品的核酸提取纯化步骤,直接进行靶基因荧光定量(探针法)DNA扩增检测的专用试剂,含有经基因改造筛选得来的可快速扩增的 DNA 聚合酶,能在 30 min 内完成 PCR 反应。本品具有很强的抑制物耐受性,无需进行 DNA 提取纯化即可用于抗凝全血、血浆、血清、咽拭子等样品的 DNA 直接扩增检测。此外,本试剂采用优化配方的 qPCR 专用 Buffer 和 UNG/dUTP 防污染系统,能够有效防止 PCR 产物残留、气溶胶污染导致的假阳性扩增。

2×Fast Direct Premix-UNG IV (Probe qPCR) 示意图

产品参数

货号MD2071-4

产品特征

  • 扩增速率不低于1kb/10s,适用于快速免提取荧光定量PCR,最快30min内完成检测。
  • 对于血液、拭子、组织匀浆等样本来源的抑制物有很好的耐受性,直接加样比例为全血≤5%, 血浆、血清≤30%。

推荐应用

  • 适用于多重多通道qPCR。
  • 适用于快速,直扩场景,对血源性样本,粪便样本耐受性较高。

实验数据

1. 植物淀粉直扩测试-1

实验条件:

产品MD2071
模板玉米淀粉
模板加量5μL/T
程序50℃ 2min;95℃ 5min;50 Cycles(95℃ 10s,55℃ 40s)

样本处理:取1g玉米淀粉溶于2 mL DNA保护液中,振荡混匀10min后,9000r/min离心4min。

提取模板:取200μl上清液采用磁珠提取试剂盒提取,80μl洗脱,加样量为5μl/T。

直扩模板:取上清20μl与60μl ddH2O混匀后直接加样,加样量为5μl/T。

实验结果:

2×Fast Direct Premix-UNG IV (Probe qPCR) 实验数据

小结:本次测试中,提取模板相对于直接扩增,每反应模板加样当量是后者的10倍,理论上Ct值差异应为3.3,实为4.34。说明,宝锐MD2071产品可用于玉米淀粉的直接扩增。

2. 口腔拭子直扩测试-2

实验条件:

产品MD2071-X
模板口腔拭子
模板加量5µl/T,10µl/T,各3T
程序50℃ 2min;95℃ 5min;50 Cycles(95℃ 10s,55℃ 40s)

样本处理:棉签刮取口腔内壁左右两侧各10次,再于1 mL H2O中洗脱,2500 r/min下离心10 min,去上清,剩约100 μL,混匀后直接加样,加样量分别为5、10 μL/T。

实验结果:

2×Fast Direct Premix-UNG IV (Probe qPCR) 实验数据

小结:MD2071-X体系能够对口腔拭子进行直接扩增,Ct值正常且扩增曲线良好。

3. DNA单管全预混室温1M稳定性测试

实验条件:

产品MD2071-X
模板DNA四重检测体系
模板加量0.025ng/μL;0.0025ng/uL
程序50℃ 2min;95℃ 5min;50 Cycles(95℃ 10s,55℃ 40s)

实验结果:

2×Fast Direct Premix-UNG IV (Probe qPCR) 实验数据

小结:MD2071-X(含DNA四重引探)全预混试剂室温存放1个月 ,单管稳定性好。

产品组分

序号组分
150×Fast Direct Enzyme/UNG Mix Ⅳ
22×Fast Direct Premix Buffer Ⅳ (dUTP)

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