产品概述
FastAmpli RT Premix-UNG (Probe qRT-PCR) 是荧光定量（TaqMan探针法）RNA扩增检测的专用试剂，含有经基因改造筛选得来的快速扩增的逆转录酶及DNA聚合酶，能在20~40 min内完成PCR反应。本品具有较强的抑制物耐受性，具有更高的反转录和PCR扩增效率，适合于低浓度RNA模板的高灵敏度扩增，在较宽的定量区域内均能得到良好的标准曲线，准确进行定量。
本试剂采用抗抑制扩增酶与UNG酶的混合酶，以及含有dUTP的优化Buffer体系，不但能够实现含抑制物样品中目的基因的良好扩增，而且可以有效防止PCR产物残留、气溶胶污染所带来的假阳性反应。
本品与多数厂家的荧光定量PCR仪兼容，如Applied Biosystems、Eppendorf、Bio-Rad和Roche等。
产品参数
| 货号 | M5144-TP |
|---|
产品特征
- 扩增速率不低于1kb/10s，适用于纯 化RNA的快速荧光定量PCR，最快30 min内完成检测。
- 具有优异的特异性和灵敏度。
推荐应用
- 人和动物相关的RNA病毒检测。
- 基因组RNA的扩增与分型检测。
- 快速扩增检测。
实验数据
1. M5144加速稳定性评价
实验条件：
| 产品货号 | M5144 |
| 反应体系 | 人总RNA三重检测体系 |
| 模板浓度 | 0.233、2.33、23.3 pg/ul |
| 反应程序 | 50℃ 15min；95℃ 1min；50 Cycles（95℃ 15s，56℃ 45s） |
实验结果：
小结：M5144试剂放置在37℃加速7天、14天后，扩增性能与未加速试剂一致，能够保持稳定。
2. M5144冻融稳定性评价
实验条件：
| 产品货号 | M5144 |
| 反应体系 | 人总RNA三重检测体系 |
| 模板浓度 | 23.3、2.33、0.233 pg/uL； |
| 反应程序 | 50℃ 15min；95℃ 1min；50 Cycles（95℃ 15s，56℃ 45s）。 |
实验结果：
小结：M5144预混液试剂在冻融5、10、15、20 次后，扩增性能与未冻融试剂一致，能够保持稳定。
3. M5144快速扩增评价
实验条件：
| 产品货号 | M5144 |
| 反应体系 | HCV-MLN双重检测体系 |
| 模板浓度 | 2.6E4 、2.6E3、130 IU/mL； |
| 反应程序 | 快速程序：50℃ 5min；95℃ 1min；50 cycles (95℃ 1 s，62℃ 10 s)。 |
实验结果：
小结：M5144试剂在快速扩增程序下可稳定检出HCV-MLN模板，可适用于快速扩增。
4. M5144扩增效率测试
实验条件：
| 产品货号 | M5144 |
| 反应体系 | 人总RNA检测体系 |
| 模板浓度 | 2320 pg/ul、232 pg/ul、23.2 pg/ul、2.32 pg/ul、0.232 pg/ul； |
| 反应程序 | 50℃ 15min；95℃ 1min；50 Cycles（95℃ 15s，56℃ 45s）。 |
实验结果：
小结：M5144试剂在宽广的模板浓度区间内具有优异的线性关系，扩增效率良好，定量结果重复可靠。
5. FM5144冻干加速稳定性(55℃)验证
实验条件：
| 产品货号 | M5144 |
| 反应体系 | 人总RNA三重检测体系 |
| 模板浓度 | 0.233、2.33、23.3pg/ul；10μl/T |
| 反应程序 | 50℃ 15min；95℃ 1min；50 Cycles（95℃ 15s，56℃ 45s）。 |
实验结果：
测试方法：将冻干样品置于55℃加速30d后，以液体试剂作为对照，进行对比测试。
小结：PFM5144-O25 55℃加速 30d，扩增性能与液体试剂一致，能保持稳定。
产品组分
| 序号 | 组分 |
|---|---|
| 1 | 10×FastAmpli RTase/UNG Mix |
| 2 | 5×FastAmpli RT Premix Buffer (dUTP) (Mg2+ free) (DG) |
| 3 | 25×MgCl2 |
资料下载
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