E.coli克隆菌宿主蛋白残留检测试剂盒（酶联免疫吸附法 · 一步法）

1. 校准曲线（线性范围）

概述：对试剂盒提供的标准品及一个空白样品进行检测。每个浓度重复检测三次，共进行三次独立实验。采用四参数逻辑回归模型拟合校准曲线。

图 1 检测范围测试结果

结论：三次重复实验中，四参数模型拟合的校准曲线 R² ≥ 0.99，所有浓度点的 RE 与 CV 均 ≤ 15%（最高与最低浓度点 ≤ 20%）。本试剂盒的检测范围为 1-243 ng/mL。

2. 准确度

概述：在已验证范围内制备校准曲线。设置五个质控（QC）水平——ULOQ、高（H）、中（M）、低（L）和 LLOQ，每个水平重复检测三次。

图 2 准确度测试结果

结论：ULOQ、高（H）、中（M）、低（L）和 LLOQ各浓度的 CV 与 RE 均 ≤20%，符合要求。

3. 重复性

概述：在已验证范围内制备校准曲线。制备高、中、低三个水平的 QC 样品，各进行 8 次平行重复检测。

表 1 重复性测试结果

结论：各浓度点的 CV ≤20%，符合要求。

4. 人间、日间、仪器间精密度

概述：同时制备校准曲线与 HQC、MQC、LQC 样品，用于检测不同分析人员、不同日期、不同仪器间的精密度。

图 3 精密度测试结果

结论：用于准确度评估的五个 QC 浓度水平，所有 RE 值均在 20% 以内。不同分析人员、不同日期、不同仪器间的 CV 值均低于 20%，符合标准。

5. 特异性

概述：在已验证范围内制备校准曲线，同时制备潜在干扰物。选择低（L）QC 水平作为最终加标浓度。

表 2 特异性测试结果

结论：该试剂盒与毕赤酵母、Sf9、MDCK、HEK293 HCP 宿主细胞蛋白在 1 µg/mL 浓度下无交叉反应，加标回收率合格。