产品概述

宝锐生物自主研发的 mRNA 加帽试剂盒,内部含有牛痘病毒加帽酶 Vaccinia Capping Enzyme(VCE) 和二氧甲基转移酶2′-O-Methyltransferase(2OM)。Vaccinia Capping Enzyme 能高效地对 mRNA的 5’端添加 m7G 帽子,即生产 Cap0 帽结构的 RNA。2′-O-Methyltransferase 对 Cap0 帽结构的 RNA,在帽结构后第一个核苷酸的2′-O 位置处增加一个甲基,形成 Cap1 帽结构的 RNA。 本试剂盒可在一管反应中同时进行 VCE 和 2OM 加帽,直接获得 Cap1 帽结构RNA,能极大提高 mRNA 在细胞内的稳定性,促进翻译效率。细胞表达效果图可参考PAGE-14。

mRNA加帽试剂盒 示意图

产品参数

货号BP-04-50

性能验证总结

1. 性能测试

描述: 采用液相色谱-质谱联用技术(LC-MS)测定经该试剂盒处理的样本的加帽率,以评估该试剂盒的性能。

mRNA加帽试剂盒 实验数据

图1 通过LC-MS检测加帽率.

结论: 使用该试剂盒可使mRNA样品加帽率达到95%以上。

2. 对使用该试剂盒处理的样本进行细胞表达验证

描述: 验证了经该试剂盒处理的GFP在细胞中的表达,并通过荧光信号反映了该试剂盒的加帽能力。

mRNA加帽试剂盒 实验数据

图2 不同阶段制备的mRNA-GFP的荧光强度结果

mRNA加帽试剂盒 实验数据

图3 不同阶段制备的 mRNA-GFP 荧光强度的统计结果

结论: 经该试剂盒处理后,mRNA-GFP的荧光强度较高,表明该试剂盒具有较强的加帽能力。

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