产品概述
Neoscript RTase Ⅱ 是在宝锐 Neoscript RTase 基础上通过理性筛选平台定向改造获得的高活性逆转录酶,具有更高的活性、温度耐受性以及更突出的抑制物耐受性,适用于高温反转录和快速反转录,有利于消除 RNA 高级结构与非特异性因素对 cDNA合成的不利影响,具有更高的稳定性和反转录合成能力。

产品参数
| 货号 | E42 |
|---|
产品特征
- 逆转录温度范围42-55℃。
- 具有优异的特异性和灵敏度。
- 活性高,适合各类快速、高灵敏度检测。
- 对血液、拭子等来源的抑制物以及样本前处理残留物质酚类、醇类等耐受性强。
推荐应用
- cDNA合成,各类RNA病原体检测。
- 基因表达分析。
- 快速扩增、直接扩增、核酸检测POCT应用 。
实验数据
1. 不同RT酶的耐抑制性
实验条件:
| 产品货号 | E42 |
| 抑制物 | 腐殖酸 (μg/mL)、乙醇(%)、异丙醇(%)、异硫氰酸胍(mM)、苯酚(mM) |
实验结果:

定义:酶的抑制物IC50值越大,代表酶对该抑制物的抗抑制能力越强。
小结:E42逆转录酶具有较好的抗抑制性能。
2. 临床样本对比测试
实验条件:
| 产品货号 | E42 |
| 反应体系 | 呼吸道RNA多重检测体系 |
| 模板加量 | 甲流&乙流咽拭子 |
| 反应程序 | 50℃ 3min,95℃ 1min;45cycles(95℃ 1s,60℃ 10s) |
实验结果:

注:使用相同的检测体系MD2104,仅更换逆转录酶,酶量保持一致。
小结:在快速直扩场景下,宝锐生物E42逆转录酶对咽拭子样本进行有效扩增,耐抑制性优于E13。
3. E42耐高温测试
实验条件:
| 产品货号 | E42 |
| 反应体系 | 人管家基因RNA四重 |
| 模板加量 | 人总RNA:0.464pg/μL,2T;4.64pg/μL,2T;5μL/25μL体系 |
| 反应程序 | 程序1:50℃ 15min;95℃ 1min;50cycles(95℃ 15s,56℃ 45s) 程序2:55℃ 15min;95℃ 1min;50cycles(95℃ 15s,56℃ 45s) 程序3:60℃ 15min;95℃ 1min;50cycles(95℃ 15s,56℃ 45s) |
| 仪器 | ABI Q5 |
实验结果:

测试方法:将E42配制为MD2104-000817体系 ,测试不同逆转录温度。
Ct值统计:

小结:宝锐生物E42逆转录酶可以兼容60℃高温反转录。
产品组分
| 序号 | 组分 |
|---|---|
| 1 | 200 U/µL Neoscript RTase Ⅱ |
| 2 | 5×First-Strand Buffer(选配) |
| 3 | *5×First-Strand Buffer 不含 dNTP,配制反应体系时请加入 dNTPs 使用。 |
资料下载
- 产品说明书(PDF)货号 E42下载
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