产品概述
Robustart Tth 是我公司开发的热启动 Tth 酶，既具有 5’-3’依赖于 DNA 模板的聚合酶活性，可广泛应用于各种 PCR 反应； 又具有在 Mn²+存在下，更高的高温反转录活性，能够有效消除 RNA 高级结构和低温条件下引物非特异性退火对 cDNA 合成 的不利影响，从而增加反转录的特异性，提高扩增的效率和产量，可以用来进行单酶一步法 RT-PCR 反应。Robustart Tth 在 常温下活性被封闭，特异性更好，能够显著增强低浓度模板的扩增效果。
产品参数
| 货号 | E17 |
|---|
产品特征
- 抗体修饰，90℃以上，30s-1min热启动。
- 具有聚合酶和逆转录酶双功能活性。
- Mn²+存在下可进行60℃-70℃高温反转录，复杂RNA模板的反转录效率更高，降低非特异性。
- 抑制物耐受性好。
推荐应用
- 定量PCR。
- 多重PCR、基因分型检测、 高灵敏度病毒检测。
实验数据
1. 冻融稳定性验证
实验条件：
| 产品货号 | E17 |
| 反应体系 | 人基因组四重检测体系 |
| 模板浓度 | 50、5E2、5E3 copies/T |
| 反应程序 | 50℃ 2min；95℃ 5min；50 Cycles（95℃ 15s，55℃ 40s） |
实验结果：
测试方法：将单酶冻融5、10、15、20次。以0次冻融为对照，在MD2011体系中进行扩增测试。
小结：在人基因组中检测，E17单酶在冻融5、10、15、20次后，扩增性能与未冻融试剂一致，能够保持稳定。
2. 加速稳定性验证
实验条件：
| 产品货号 | E17 |
| 反应体系 | 人基因组四重检测体系 |
| 模板浓度 | 50、5E2、5E3 copies/T |
| 反应程序 | 50℃ 2min；95℃ 5min；50 Cycles（95℃ 15s，55℃ 40s） |
实验结果：
测试方法：将单酶加速7、14天。以0天加速为对照，在MD2011体系中进行扩增测试。
小结：在人基因组检测中，E17单酶放置在37℃加速7天、14天后，扩增性能与未加速试剂一致，能够保持稳定。
3. 运输稳定性验证
实验条件：
| 产品货号 | E17 |
| 反应体系 | 血清-DNA三重检测体系 |
| 模板 | 人全血模板 |
| 模板浓度 | 1.6*60、1.6E3、1.6E4 copies/T |
| 反应程序 | 50℃ 2min；95℃ 5min；50cycles（95℃ 10s，55℃ 40s） |
实验结果：
测试方法：将单酶顺丰航空快运运输84h后，以-20℃±5℃保存的试剂作为对照。在MD2031体系中进行验证
小结：E17在84h运输后较-20°C±5°C保存同批次样品，在人全血稀释的人基因组模板下，各通道下，ΔCT值差异均＜0.5；Rn%<10%，线性拟合度良好。
4. 抗抑制验证（口腔拭子直扩测试）
实验条件：
| 产品货号 | E17 |
| 反应体系 | 人基因组四重检测体系 |
| 模板 | 口腔拭子 |
| 模板浓度 | 5µl/T，10µl/T，各3T |
| 反应程序 | 50℃ 2min；95℃ 5min；50 Cycles（95℃ 10s，55℃ 40s） |
实验结果：
测试方法：棉签刮取口腔内壁左右两侧各10次，再于1 mL H2O中洗脱，2500 r/min下离心10 min，去上清，剩约100 μL，混匀后直接加样。
小结：E17能够对口腔拭子进行直接扩增，Ct值正常且扩增曲线良好。
产品组分
| 序号 | 组分 |
|---|---|
| 1 | 5 U/µL Robustart Tth |
| 2 | 10×Tth RT Buffer Basic (Mn²+ free)（选配） |
| 3 | 25 mM Mn(OAc)₂（选配） |
| 4 | *10×Tth RT Buffer Basic (Mn²+ free)不含 dNTP 和 Mn²+，配制反应体系时请加入 dNTPs 和 Mn(OAc)₂使用。 |
资料下载
- 产品说明书（PDF）货号 E17下载
- 其他资料需要其他产品资料，可以向销售索取
