Klenow片段(3‘→5’外切酶缺陷型)
定向改造保留3‘端完整性 | NGS建库与探针标记专用酶
本产品为大肠杆菌(E. coli) DNA聚合酶I大片段的重组突变体,又称外切酶缺陷型Klenow片段。通过定点突变技术定向失活野生型酶的3‘→5’外切酶(校对)活性,完整保留5‘→3’DNA聚合酶活性,且继承了天然Klenow片段无5‘→3’外切酶活性的特性。该酶对引物或模板的3‘末端无可检出的外切降解活性,无显著链置换活性,是需保留3’端完整性的分子生物学实验的理想选择。经严格批次质控,确认无DNase、RNase及非特异性核酸酶残留,保障实验可重复性。
1. 精准活性改造:
定向失活3‘→5’外切酶校对活性,完全保留5‘→3’聚合功能,无5‘→3’外切酶活性干扰下游实验,活性谱清晰可控。
2. 3‘端完整性保护:
避免引物或模板3’末端非特异性降解,完美适配对3‘端修饰敏感的实验场景。
3. 高纯度批次稳定:
每批次均经过严格核酸酶残留检测,无DNase、RNase及非特异性核酸酶污染,实验结果可重复性强。
4. 反应兼容性强:
可在温和反应条件下高效催化DNA合成,适配常规分子生物学缓冲体系与实验流程,无需繁琐条件优化。

1. NGS文库构建:DNA片段文库的末端修复、RNA-seq流程的cDNA第二链合成。
2. 核酸探针制备:随机引物/特异性引物标记(放射性、荧光、生物素标记)。
3. 分子克隆:引物延伸分析、定点突变、Sanger双脱氧链终止法测序。
4. 基因组研究:5‘突出端补平反应、平末端DNA片段制备。
5. 诊断试剂研发:扩增类或杂交类检测试剂的核心酶原料开发。