AcuGenix™ 第一链cDNA合成试剂盒(用于单细胞3′ RNA测序)
模板转换技术赋能全长cDNA合成 适配高保真单细胞转录组研究
本试剂盒专为哺乳动物细胞或无细胞壁真核细胞的单细胞3′ RNA测序场景开发,通过工程化逆转录酶与优化的模板转换流程,可高效合成保留mRNA 5′端序列信息的全长第一链cDNA,产物两端携带已知固定序列,可直接用于下游测序文库构建。

1. 模板转换实现全长cDNA合成:
工程化逆转录酶通过oligo(dT)引物结合mRNA的poly(A)尾启动逆转录,到达mRNA 5′端后,其末端转移酶活性会在新合成cDNA的3′端添加3个胞嘧啶(CCC)尾。该poly(C)尾可作为锚定位点,与预添加的模板转换寡核苷酸(TSO)结合——TSO的3′端携带3个与之互补的鸟嘌呤(GGG),触发模板转换效应,逆转录酶继续延伸至TSO末端,最终获得两端带标准化序列的全长cDNA,避免传统逆转录的5′端偏好性。
2. 工程化逆转录酶性能卓越:
与野生型M-MLV逆转录酶相比,本试剂盒采用的工程化酶热稳定性显著提升、逆转录效率更优、耐受高浓度DTT,在各类反应条件下均能保持稳健性能。
3. 宽模板投入范围兼容:
可适配10 pg至1 μg含poly(A)尾的总RNA,同时支持单细胞与低起始量常规RNA实验需求。
4. 下游流程无缝衔接:
所得全长cDNA两端序列标准化,可直接用于cDNA扩增、酶切片段化、测序文库构建等标准流程,无需额外修饰步骤。

1. 高通量单细胞3′ RNA测序(scRNA-seq)。
2. 稀有细胞群转录组分析(如循环肿瘤细胞、抗原特异性免疫细胞)。
3. 微量真核细胞样本的低起始量转录组研究。
4. 转录本异构体发现所需的全长cDNA文库构建。