Brizol Reagent是宝锐生物开发的一款经典的传统“Trizol”类、广谱型总RNA提取试剂。产品适用范围广泛，可以从病毒、动物组织、血液、植物材料、各种微生物及培养细胞等样品中提取总RNA。
本品能够有效抑制RNase活力，有效提取样本中的总RNA，最大限度的消除了DNA和蛋白质等杂质的污染，RNA样本的完整性高，可用于各种分子生物学常规实验，如RT-PCR、Real-time RT-PCR、Northern Blot、Dot Blot、体外翻译、PolyA 筛选、RNase保护分析、高通量测序和分子克隆等。
Brizol Reagent是含有苯酚、异硫氰酸胍和其他特殊组分的单相溶液，可促进提取各种大小分子量的RNA。
在Brizol Reagent进行样本匀浆化的过程中，它可以破坏细胞，溶解细胞组分，同时高效的抑制RNA酶的活性，从而维持RNA的完整性。采用Brizol Reagent进行样本匀浆化后，加入氯仿，匀浆物可分成透明的上层水相层（含有RNA）、相界面和紫红色的下层有机层（含有DNA和蛋白质）。然后用异丙醇从水相层中沉淀出RNA。
1.样本裂解
取适量新鲜生物样本处理后（根据样品的不同，需研磨或匀浆使样品尽可能充分分离成单细胞状态）置于无RNA酶的离心管中，每50 - 100 mg样品加入1mL Brizol Reagent试剂充分涡旋振荡，使样本完全裂解。室温静置 5min，让核蛋白复合物充分解离。
2.相分离
向裂解液中加入0.2 mL氯仿，剧烈颠倒离心管15 s，充分混匀。室温静置2~3 min。4℃，12000 rpm离心15 min，离心后溶液分为三层：上层无色水相（含 RNA）、中间白色蛋白层、下层紫红色有机相。
小心吸取上层水相（约400~500μL，避免触碰中间层）至新的无RNA酶离心管。加入等体积异丙醇，轻柔颠倒混匀，室温静置10 min。4℃，12000 rpm离心10 min，管底会出现白色RNA沉淀。
4.RNA洗涤
弃去上清液，沿管壁缓慢加入1 mL 75%无RNA酶乙醇（DEPC水配制），轻轻颠倒洗涤沉淀。4℃，12000 rpm离心5 min，弃去上清液。
5.RNA干燥与溶解
小心吸尽残留乙醇，室温干燥RNA沉淀2~3 min（避免过度干燥，否则难以溶解）。加入适量无RNA酶水或TE缓冲液，轻柔吹打混匀。溶解后可通过分光光度计检测 RNA 浓度与纯度（OD₂₆₀/OD₂₈₀ 比值在1.8~2.0为佳），也可琼脂糖凝胶电泳检测完整性。
提取流程图如下：
提取总RNA电泳时，因核糖体RNA (rRNA) 占总RNA的75~85%，因此电泳图通常看到的是rRNA (28S、23S、18S、16s、5S) ，同时可以用rRNA的完整性间接推测mRNA的完整性；真核生物rRNA的28S:18S (原核生物rRNA的23S:16S) 比例通常约为1:1~2:1时，提示RNA无明显降解，可用于下游应用。
结论：Brizol Reagent与竞品相比RNA提取完整性好，得率高，适用范围广。
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