质控优选丨Sf弹状病毒检测试剂盒

从雌性草地夜蛾蛹中分离得到的昆虫细胞系（Sf）在杆状病毒昆虫细胞系统（Baculovirus‐insectcellsystem，BICS）中被广泛用作重组蛋白生产的宿主。然而，在Sf细胞系中发现的新弹状病毒（Sf‐RV）引起了人们对BICS生产的生物制剂安全性的担忧。

《中国药典》2020版新增了“生物制品病毒安全性控制”章节，强调了生物制品生产过程中潜在的病毒污染风险，并提出了全面的风险评估和控制措施，包括对原材料的来源控制、生产过程的病毒污染筛查、特定病毒清除工艺的验证以及对产品病毒污染的检测。根据我国药审中心发布的《生物组织提取制品和真核细胞表达制品的病毒安全性评价技术审评一般原则》，动物源性细胞表达的生物制品必须执行内源性和外源性病毒检测，并且需要对病毒灭活／去除工艺进行验证。ISO224422-1中指出动物源性医疗器械需对外源性病毒进行控制。

对生产过程中Sf弹状病毒的检测是控制生物制品的病毒安全性风险、保证生产质量的重要手段。

检测限达到0.5copies/μL。

验证了27种Sf弹状病毒的结构类似物和常用的细胞系，均与Sf弹状病毒检测试剂无交叉反应。

1. 一步法RT-qPCR试剂，提取好的核酸直接加入预混的PCR反应液中，无需提前进行反转录，减少了操作步骤。

2. 检测高效，全程仅需2小时，从样本提取至结果出炉。

广泛验证多种样本类型，确保检测灵敏度不受基质影响。

1. 检测试剂含内部质控 (IC) 和阳性质控 (PC)，有效避免假阴性和假阳性结果的出现；

2. 采用UDG酶防污染系统，避免污染风险。

1. 冻融稳定性：

试剂盒反复冻融3次、5次、7次、10次，检测限样本检测结果为阳性，中值样本Ct值精密度CV≤5%，说明试剂盒冻融10次内，稳定性良好。

2. 仪器适用性：

在ABI7500、ABlQuantStudio™5、Bio-RadCFX96、SLAN-96P、SLAN-96S、罗氏Lightcycler480Ⅱ等多种型号的设备上均能正常检出。

参考文献：

1.《中国药典》2020版第三部-生物制品生产和检定用动物细胞基质制备及质量控制。

2.《中国药典》2020版第三部-生物制品病毒安全性控制。

3.《生物组织提取制品和真核细胞表达制品的病毒安全性评价技术审评一般原则》。

4.《欧洲药典》EP10。

5.《日本药典（JP第17版）》。