使用T7 RNA 聚合酶体外转录(IVT, In Vitro Transcription)制备mRNA的过程中会产生双链 RNA (dSRNA, double-stranded RNA)等副产物，dSRNA 除了会触发机体的天然免疫反应，还可能导致mRNA发生降解， 因此 dsRNA的残留量是 mRNA 药物的关键质量属性。
本试剂盒应用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA) 检测体外转录体系或合成的mRNA 原液中 dsRNA 的含量。用捕获抗体包被微孔板，形成固相抗体，向固相抗体微孔板中加入dsRNA 标准品和待测样品，然后添加辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体，形成抗体-抗原-抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物 TMB 显色，显色液在 HRP 酶的催化下转化成蓝色并在酸的作用下最终转换成⻩色，颜色的深浅与样品中 dsRNA 的量呈正相关。
产品名称：T7 高效转录试剂盒 货号：BP-01-50
产品名称：T7 RNA 聚合酶3.0 货号：BP- E11
产品名称：PolyA尾长度分布检测前处理试剂盒 货号：BP-11-10
1. 标准曲线
描述：通过双链RNA标准品的梯度稀释法建立标准曲线。
图 1 dsRNA标准品的吸收值（左）和制备的标曲
结论：双链RNA标准品经梯度稀释后用于吸光度测定；数据采用四参数拟合曲线进行处理。结果表明，R²值大于0.99。
2. 试剂盒的回收率
描述：将不同浓度的 dsRNA 标准品加入已知浓度的样品中，根据实测浓度与理论浓度之间的差异，确定试剂盒回收率的准确性。
表1 试剂盒回收率
结论：样品检测浓度相对偏差均≤15%，回收率符合80%-120%。
3. 重复性
描述：对高、中、低浓度样品分别进行6复孔测定，检测浓度CV符合要求。
表2 重复性验证
结论：重复性试验在标准样品的三种浓度（高、中、低）下进行。每组试验重复6次，各组的变异系数均小于10%，符合要求，表明该试剂盒的重复性良好。
4. 批间精密度
描述：同一操作者同一时间检测3个批次试剂盒，每批次均检测高、中、低浓度样品各6次，各浓度样品共54次检测结果，精密度结果符合要求。
表3 批间精密度
结论：准确度由同一名操作人员通过对三批检测试剂盒进行单次分析来评估。每批试剂盒分别采用高、中、低浓度样本进行6次重复检测；所有批次的变异系数均小于10%，处于预设的可接受范围内，表明其批间精密度良好。
5. 人间精密度
描述：两个操作者同一时间检测1个批次试剂盒，每批次均检测高、中、低浓度样品各6次，各浓度样品共36次检测结果，精密度结果符合要求。
表 4 人间精密度
结论：人工精密度的评估方法为：由两名操作人员同时对同一批试剂进行检测；每位操作人员分别对高浓度、中浓度及低浓度样本各进行 6 次重复测定。所得精密度值均在预设的可接受范围内。
