Fast Direct Premix-UNG Ⅳ (Probe qPCR) 是专用于免除样品的核酸提取纯化步骤,直接进行靶基因荧光定量(探针法)DNA扩增检测的专用试剂,含有经基因改造筛选得来的可快速扩增的 DNA 聚合酶,能在 30 min 内完成 PCR 反应。本品具有很强的抑制物耐受性,无需进行 DNA 提取纯化即可用于抗凝全血、血浆、血清、咽拭子等样品的 DNA 直接扩增检测。此外,本试剂采用优化配方的 qPCR 专用 Buffer 和 UNG/dUTP 防污染系统,能够有效防止 PCR 产物残留、气溶胶污染导致的假阳性扩增。


1. 50×Fast Direct Enzyme/UNG Mix Ⅳ
2. 2×Fast Direct Premix Buffer Ⅳ (dUTP)

1.扩增速率不低于1kb/10s,适⽤于快速免提取荧光定量PCR,最快30min内完成检测。
2.对于血液、拭子、组织匀浆等样本来源的抑制物有很好的耐受性,直接加样比例为全血≤5%, 血浆、血清≤30%。

1. 适用于多重多通道qPCR。
2. 适用于快速,直扩场景,对血源性样本,粪便样本耐受性较高。
1. 植物淀粉直扩测试-1
实验条件:
产品 | MD2071 |
模板 | 玉米淀粉 |
模板加量 | 5μL/T |
程序 | 50℃ 2min;95℃ 5min;50 Cycles(95℃ 10s,55℃ 40s) |
样本处理:取1g玉米淀粉溶于2 mL DNA保护液中,振荡混匀10min后,9000r/min离心4min。
提取模板:取200μl上清液采用磁珠提取试剂盒提取,80μl洗脱,加样量为5μl/T。
直扩模板:取上清20μl与60μl ddH2O混匀后直接加样,加样量为5μl/T。
实验结果:

小结:本次测试中,提取模板相对于直接扩增,每反应模板加样当量是后者的10倍,理论上Ct值差异应为3.3,实为4.34。说明,宝锐MD2071产品可用于玉米淀粉的直接扩增。
2. 口腔拭子直扩测试-2
实验条件:
产品 | MD2071-X |
模板 | 口腔拭子 |
模板加量 | 5µl/T,10µl/T,各3T |
程序 | 50℃ 2min;95℃ 5min;50 Cycles(95℃ 10s,55℃ 40s) |
样本处理:棉签刮取口腔内壁左右两侧各10次,再于1 mL H2O中洗脱,2500 r/min下离心10 min,去上清,剩约100 μL,混匀后直接加样,加样量分别为5、10 μL/T。
实验结果:

小结:MD2071-X体系能够对口腔拭子进行直接扩增,Ct值正常且扩增曲线良好。
3. DNA单管全预混室温1M稳定性测试
实验条件:
产品 | MD2071-X |
模板 | DNA四重检测体系 |
模板加量 | 0.025ng/μL;0.0025ng/uL |
程序 | 50℃ 2min;95℃ 5min;50 Cycles(95℃ 10s,55℃ 40s) |
实验结果:

小结:MD2071-X(含DNA四重引探)全预混试剂室温存放1个月 ,单管稳定性好。