Robustart ARMS Gene-typing Premix-UNG (Probe qPCR) (002902) 是基于突变阻滞扩增系统(amplification refractory mutation system,ARMS-PCR)的原理,开发的一款同时兼顾扩增性能和错配碱基识别能力的,用探针法进行Real Time PCR 定性、定量反应的专用扩增试剂。
本品含有经基因改造筛选后、在常温下完全封闭 Taq 酶活性的抗体修饰热启动 Taq DNA 聚合酶,该酶可以催化 5’至 3’方向严格依赖于 DNA 模板和碱基配对原则的高特异性的扩增反应,适合用于特异性要求更高的突变位点检测,尤其适合于 ARMS-PCR 荧光定量检测。
本试剂采用 UNG/dUTP 防污染系统,不但能够实现含抑制物样品中目的基因的良好扩增,而且可以有效防止 PCR 产物残留、气溶胶污染所带来的假阳性反应。

2×Robustart ARMS Gene-typing Premix-UNG (Probe qPCR) (002902)
*本试剂已含有热启动 DNA 聚合酶、PCR Buffer、MgCl2、dNTPs、稳定剂等成分。

1. 兼顾高效扩增性能和3’错配识别能力,适用于纯化模板。
2. 应⽤性广,可检测多种基因突变。
3. 操作方便,无需繁琐优化。

1. 肿瘤的个体化分子检测、基因突变和SNP位点检测。
2. 遗传病筛查、疾病易感基因检测。
3. 农牧业配种、动植物检验检疫。
1. 与市场同类产品对比测试-1
实验条件:
产品 | M2281-X | 体系 | CYP2C19检测体系,25μL |
模板 | 人基因组模板 | 模板浓度 | 0.125 ng/ul,2T,5μL/T |
程序 | 50℃ 2min;95℃ 3min;50 Cycles(95℃ 15s,60℃ 45s) |
测试方法:使用不同扩增试剂搭配CYP2C19野生型引探(WT pbmix)和突变型引探(MT pbmix)分别扩增人基因组模板,检测CYP2C19基因多态性,包括等位基因CYP2C19*2 (ROX通道,rs4244285, c.681G>A)、CYP2C19*3 (VIC通道,rs4986893, c.636G>A)和CYP2C19*17 (FAM通道,rs12248560, c.-806C>T);该人基因组模板CYP2C19*2为杂合型、CYP2C19*3为野生型、CYP2C19*17为杂合型。
实验结果:

小结:宝锐M2281-X试剂可成功区分CYP2C19各等位基因、正确判别基因型,扩增性能和错配识别性能显著优于市场同类产品。
2. 与市场同类产品对比测试-2
实验条件:
产品 | M2281-X | 体系 | G6PD检测体系,25μL |
模板 | 人基因组模板 | 模板浓度 | 0.125 ng/ul,2T,5μL/T |
程序 | 50℃ 2min;95℃ 3min;50 Cycles(95℃ 15s,60℃ 45s) |
测试方法:使用不同扩增试剂搭配G6PD野生型引探(WT pbmix)和突变型引探(MT pbmix)分别扩增人基因组模板,检测G6PD基因多态性,FAM通道检测G6PD基因c.95A>G突变、VIC通道检测G6PD基因c.1376G>T突变,ROX通道检测G6PD基因c.1388G>A突变;该人基因组模板G6PD基因c.95A>G、c.1376G>T、c.1388G>A均为野生型。
实验结果:

小结:宝锐M2281-X试剂可成功区分G6PD各等位基因、正确判别基因型,扩增性能不低于市场同类产品、错配识别性能显著优于市场同类产品。