E.coli表达菌宿主蛋白残留检测试剂盒（酶联免疫吸附法·一步法）

大肠杆菌（蛋白表达菌）是重组细胞因子、酶类及多肽药物等生物治疗产品的核心原核表达宿主。生产与纯化过程中产生的宿主细胞蛋白（HCP）残留是关键工艺相关杂质。这些微量污染物可能引发免疫原性风险，并损害成品的纯度与安全性。HCP 残留检测是工艺表征、过程控制与产品放行的核心检测项目。本试剂盒的抗原、抗体等关键原料均由珠海宝锐生物科技有限公司自主生产。试剂盒已按照美国药典、中国药典、欧洲药典等法规完成了全面的方法学性能验证，满足国内外生物制药监管机构对 HCP 检测的技术要求。本试剂盒的检测限（LOD）约为 0.577 ng/mL，定量下限（LLOQ）约为 1.55 ng/mL。

表达体系专属检测需求。                                                                                                                                                  

1. 校准曲线（检测范围）
概述：对试剂盒提供的标准品及一个空白样品进行检测。每个浓度重复检测三次，共进行三次独立实验。采用四参数逻辑回归模型拟合校准曲线。

图 1 检测范围测试结果

结论：三次重复实验中，4PL 模型拟合的校准曲线 R² ≥ 0.99，所有浓度点的 RE 与 CV 均 ≤ 15%（最高与最低浓度点 ≤ 20%）。本试剂盒的检测范围为 2-100 ng/mL。

2. 准确度
概述：在已验证范围内制备校准曲线。设置五个质控（QC）水平——ULOQ、高（H）、中（M）、低（L）和 LLOQ，每个水平重复检测三次。

图 2 准确度测试结果

结论：各浓度点的 CV 与 RE 均 ≤20%，符合要求。

3. 重复性

概述：参照已验证的线性范围制备校准曲线。另制备H、M、L质控点，各质控点做8平行重复。样品检测浓度CV≤20%

表 1 重复性测试结果

结论：实测浓度的 CV ≤20%。

4. 人间、日间、仪器间精密度
概述：同时制备校准曲线与 HQC、MQC、LQC 样品，用于检测不同分析人员、不同日期、不同仪器间的精密度。

图 3 精密度测试结果

结论：用于准确度评估的五个 QC 浓度水平，所有 RE 值均在 20% 以内。不同分析人员、不同日期、不同仪器间的 CV 值均低于 20%，符合验收标准。

5. 特异性
概述：在已验证范围内制备校准曲线，同时制备潜在干扰物。选择低（L）QC 水平作为最终加标浓度。

表 2 特异性测试结果

结论：该试剂盒与毕赤酵母、Sf9、MDCK、CHO 宿主细胞蛋白在 1 µg/mL 浓度下无交叉反应，加标回收率在可接受范围内。